查看完整版本: 硝基呋喃代谢物检测方法

硝基呋喃代谢物检测方法

[align=center][align=center][color=#000000][b][font=宋体][size=15pt]硝基呋喃类代谢物快速检验方法[/size][/font][/b][b][size=15pt][/size][/b][/color][/align][/align][align=center][align=center][color=#000000][b][size=15pt][font=Times New Roman]—[/font][/size][/b][b][font=宋体][size=15pt]高效液相色谱法[/size][/font][/b][b][size=15pt][/size][/b][/color][/align][/align][size=3][font=黑体][b][color=black][size=10.5pt]1[/size][/color][/b][b][color=black][size=10.5pt]、范围[/size][/color][/b][/font][/size]
[size=3][color=#000000][font=宋体][size=10.5pt]本方法规定了[/size][/font][font=宋体][size=10.5pt]动物源性食品中四种硝基呋喃类代谢物[/size][/font][font=宋体][size=10.5pt]残留量的高效液相色谱快速测定方法。[/size][/font][size=10.5pt][/size][/color][/size]
[size=3][color=#000000][font=黑体][b][size=10.5pt]2[/size][/b][b][size=10.5pt]、原理[/size][/b][/font][/color][/size]
[size=3][color=#000000][font=宋体][size=10.5pt]试样中残留的硝基呋喃代谢物用硝基呋喃类代谢物快速检测前处理试剂盒提供的试剂提取、衍生化、净化后用液相色谱进行检测，外标法定量。[/size][/font][size=10.5pt][/size][/color][/size]
[size=3][color=#000000][font=黑体][b][size=10.5pt]3[/size][/b][b][size=10.5pt]、试剂和材料[/size][/b][/font][/color][/size]
[size=3][color=#000000][font=宋体][size=10.5pt]除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为重蒸馏水。[/size][/font][size=10.5pt][/size][/color][/size]
[size=3][color=#000000][size=10.5pt][font=Times New Roman]3.1.1[/font][/size][font=宋体][size=10.5pt]乙腈：色谱纯。[/size][/font][/color][/size]
[size=3][color=#000000][size=10.5pt][font=Times New Roman]3.1.2[/font][/size][font=宋体][size=10.5pt]乙酸乙脂：色谱纯。[/size][/font][font=宋体][size=10.5pt][/size][/font][/color][/size]
[size=3][color=#000000][font=Times New Roman][size=10.5pt]3.1.3[/size]
[/font][font=宋体][size=10.5pt]甲醇[/size][/font][size=10.5pt][font=Times New Roman]:[/font][/size][font=宋体][size=10.5pt]色谱纯。[/size][/font][size=10.5pt][font=Times New Roman]
[/font][/size][/color][/size]
[size=3][color=#000000][font=Times New Roman][size=10.5pt]3.1.4[/size]
[/font][font=宋体][size=10.5pt]三乙胺[/size][/font][size=10.5pt][/size][/color][/size]
[size=3][color=#000000][font=Times New Roman][size=10.5pt]3.1.5[/size]
[/font][font=宋体][size=10.5pt]磷酸[/size][/font][size=10.5pt][font=Times New Roman](85%)[/font][/size][/color][/size]
[font=黑体][size=3][color=#000000][size=10.5pt]3.1.6[/size]
[/color][/size][/font][font=宋体][size=10.5pt][size=3][color=#000000]标准品: 氨基脲（SEM）、3-氨基-2-唑烷基酮（AOZ）、5-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基酮（AMOZ）、1-氨基-乙内酰脲（AHD）：≧99%。[/color][/size][/size][/font]
[font=黑体][size=3][color=#000000][size=10.5pt]3.1.7[/size]
[/color][/size][/font][font=宋体][size=10.5pt][size=3][color=#000000]标准贮备溶液:准确称量各SEM 、AOZ 、AMOZ 、AHD 各10 mg，用甲醇分别定容于100 mL容量瓶中，配制成100 µg/mL的标准贮备液。[/color][/size][/size][/font]
[font=黑体][size=3][color=#000000][size=10.5pt]3.1.8[/size]
[/color][/size][/font][size=3][color=#000000][font=宋体][size=10.5pt]硝基呋喃类代谢物快速检测前处理试剂盒：(提取剂1 20瓶、[/size][/font][size=10.5pt][font=黑体]提取剂2 20瓶（20mL/瓶）、衍生化试剂2瓶、催化剂2瓶、净化柱20根、溶解液3瓶)
[/font][/size][/color][/size]
[size=3][color=#000000][font=黑体][b][size=10.5pt]4[/size][/b][b][size=10.5pt]、仪器和设备[/size][/b][/font][/color][/size]
[size=3][color=#000000][font=宋体][size=10.5pt]4.1.1[/size][/font][font=宋体][size=10.5pt]高效液相色谱仪：配紫外-可见检测器.[/size][/font][/color][/size]
[size=3][color=#000000][font=宋体][size=10.5pt]4.1.2[/size][/font][font=宋体][size=10.5pt]匀浆机。[/size][/font][/color][/size]
[size=3][color=#000000][font=宋体][size=10.5pt]4.1.3[/size][/font][font=宋体][size=10.5pt]旋转蒸发仪。[/size][/font][/color][/size]
[size=3][color=#000000][font=宋体][size=10.5pt]4.1.4[/size][/font][font=宋体][size=10.5pt]离心机：4 000 r/min[/size][/font][/color][/size]
[size=3][color=#000000][font=宋体][size=10.5pt]4.1.5[/size][/font][font=宋体][size=10.5pt]可水浴加热超声波清洗机或恒温水浴摇床。[/size][/font][/color][/size]
[size=3][color=#000000][font=宋体][size=10.5pt]4.1.6[/size][/font][font=宋体][size=10.5pt]聚四氟乙烯离心管:100 mL，具塞。[/size][/font][/color][/size]
[size=3][color=#000000][font=宋体][size=10.5pt]4.1.7[/size][/font][font=宋体][size=10.5pt]微孔滤膜:0.45 µm。[/size][/font][/color][/size]
[size=3][color=#000000][font=黑体][b][size=10.5pt]5[/size][/b][b][size=10.5pt]、测定步骤[/size][/b][/font][/color][/size]
[size=3][color=#000000][font=黑体][b][size=10.5pt]5.1[/size][/b][b][size=10.5pt]提取、衍生化、净化[/size][/b][/font][/color][/size]
[font=黑体][size=3][color=#000000][b]5.1.1[/b][b]提取：[/b][/color][/size][/font][size=3][color=#000000][font=宋体]准确称取已捣碎的样品10.00 g于50 mL离心管中,先后加入提取剂1及提取剂2(液体20.0 mL) 后于4000 r/min离心5 min；[/font][font=宋体][/font][/color][/size]
[font=黑体][size=3][color=#000000][b][font=宋体]5.1.2[/font][/b][b]衍生化：[/b][/color][/size][/font][font=宋体][size=3][color=#000000]取出5.1.1中上清液于50 mL离心管中，加入衍生化试剂0.5mL及催化剂0.5mL后混匀，于40℃超声波清洗机中超声60 min，取出冷至室温。[b][/b][/color][/size][/font]
[font=黑体][size=3][color=#000000][b][font=宋体][size=10.5pt]5.1.3[/size][/font][/b][b][font=宋体][size=10.5pt]净化[/size][/font][/b][font=宋体][size=10.5pt]：[/size][/font][/color][/size][/font][size=3][color=#000000][font=宋体][size=10.5pt]将净化柱依次用5mL甲醇、5mL乙酸乙脂激、5mL水激活后，加5.1.2中调后试剂正压或负压以2～3mL/min速度过柱，流净后加10mL蒸馏水洗涤，挤干，弃去流出液，用10mL乙酸乙脂以2～3mL/min速度洗脱，接收全部洗脱液35℃～40℃水浴旋转蒸干或氮气吹干。残留物用1.0 mL溶解液及2.0mL正己烷溶解，大于[/size][/font][font=宋体]4000 r/min[/font][font=宋体]离心5 min[/font][font=宋体][size=10.5pt]液液萃取后取下层液体供仪器测定。[/size][/font][/color][/size]
[size=3][color=#000000][font=黑体][b][font=宋体][size=10.5pt]5.2[/size][/font][/b][b][font=宋体][size=10.5pt]绘制标准工作曲线[/size][/font][/b][/font][/color][/size]
[size=3][color=#000000][font=宋体][size=10.5pt]移取[/size][/font][font=宋体][size=10.5pt]SEM [/size][/font][font=宋体][size=10.5pt]、AOZ 、AMOZ 、AHD混和标准溶液，在10mL提取剂2添加1µg/kg、5µg/kg、10µg/kg、20µg/kg、50µg/kg标准工作溶液，按5.3测定步骤处理,样液用高效液相色谱仪测定，得出标准工作曲线。[/size][/font][/color][/size]
[font=Times New Roman][size=3][color=#000000] [/color][/size][/font]
[size=3][color=#000000][font=黑体][b][size=10.5pt]5.3[/size][/b][b][size=10.5pt]测定[/size][/b][/font][/color][/size]
[size=3][color=#000000][font=黑体][b][size=10.5pt]5.3.1[/size][/b][b][size=10.5pt]液相色谱条件[/size][/b][/font][/color][/size]
[size=3][color=#000000][size=10.5pt][font=Times New Roman]a) [/font][/size][font=宋体][size=10.5pt]色谱柱[/size][/font][size=10.5pt][font=Times New Roman]: CN[/font][/size][font=宋体][size=10.5pt]柱，[/size][/font][size=10.5pt][font=Times New Roman]250 mm[/font][/size][font=宋体][size=10.5pt]×4.6 mm(i.d.),粒度5[/size][/font][font=Times New Roman][size=10.5pt]µm;[/size][font=宋体][size=10.5pt][/size][/font][/font][/color][/size]
[size=3][color=#000000][font=宋体][size=10.5pt]b) [/size][/font][font=宋体][size=10.5pt]流动相:0.05mol/L磷酸/三乙胺缓冲液(pH2.4)+乙腈[/size][/font][size=10.5pt][font=Times New Roman](91+9,[i]V/V[/i]);[/font][/size][/color][/size]
[size=3][color=#000000][size=10.5pt][font=Times New Roman]c) [/font][/size][font=宋体][size=10.5pt]流速[/size][/font][size=10.5pt][font=Times New Roman]:1.0 mL/min[/font][/size][font=宋体][size=10.5pt];[/size][/font][size=10.5pt][/size][/color][/size]
[size=3][color=#000000][size=10.5pt][font=Times New Roman]d) [/font][/size][font=宋体][size=10.5pt]柱温[/size][/font][size=10.5pt][font=Times New Roman]:[/font][font=Times New Roman]25[/font][font=宋体]℃[/font][font=Times New Roman];[/font][/size][/color][/size]
[size=3][color=#000000][size=10.5pt][font=Times New Roman]e) [/font][/size][font=宋体][size=10.5pt]检测波长：[/size][/font][font=Times New Roman][size=10.5pt]280nm[/size][font=宋体][size=10.5pt][/size][/font][/font][/color][/size]
[size=3][color=#000000][size=10.5pt][font=Times New Roman]f) [/font][/size][font=宋体][size=10.5pt]进样量：[/size][/font][size=10.5pt][font=Times New Roman]50 µL[/font][/size][font=宋体][size=10.5pt]。[/size][/font][size=10.5pt][/size][/color][/size]
[size=3][color=#000000][font=黑体][b][size=10.5pt]5.3.2[/size][/b][b][size=10.5pt]色谱测定[/size][/b][/font][/color][/size]
[size=3][color=#000000][font=宋体][size=10.5pt]根据样液中SEM 、AOZ 、AMOZ 、AHD的含量情况，选定峰面积相近的标准工作溶液。标准工作溶液和样液中SEM 、AOZ 、AMOZ 、AHD的响应值均应在仪器的检测线性范围内。在上述色谱条件下，[/size][/font][font=宋体][size=10.5pt]孔[/size][/font][font=宋体][size=10.5pt]SEM [/size][/font][font=宋体][size=10.5pt]、AOZ 、AMOZ 、AHD[/size][/font][font=宋体][size=10.5pt]的[/size][/font][font=宋体][size=10.5pt]保留时间约为AMOZ[b] 10.0min[/b][b]、[/b]AHD[b]13.3min[/b][b]、[/b]SEM[b] 14.5min[/b][b]、[/b]和AOZ[b]18.6min[/b][b]。[/b][/size][/font][font=宋体][size=10.5pt]鱼样品空白及添加色谱图参见附录[/size][/font][size=10.5pt][font=Times New Roman]A[/font][/size][font=宋体][size=10.5pt]中图[/size][/font][size=10.5pt][font=Times New Roman]A.1[/font][/size][font=宋体][size=10.5pt]、[/size][/font][size=10.5pt][font=Times New Roman]A2[/font][/size][font=宋体][size=10.5pt]。[/size][/font][size=10.5pt][/size][/color][/size]
[size=3][color=#000000][font=黑体][b][size=10.5pt]5.3.3[/size][/b][b][size=10.5pt]空白实验[/size][/b][/font][/color][/size]
[font=宋体][size=10.5pt][size=3][color=#000000]除不加试样外，按上述测定步骤进行。[/color][/size][/size][/font]
[size=3][color=#000000][font=黑体][b][size=10.5pt]5.4[/size][/b][b][size=10.5pt]结果计算[/size][/b][/font][/color][/size]
[size=3][color=#000000][font=宋体][size=10.5pt]用色谱数据处理机或[/size][/font][font=宋体][size=10.5pt]按式（2）分别计算供试样品中的SEM 、AOZ 、AMOZ 、AHD残留量。[/size][/font][/color][/size]
[size=3][color=#000000][font=宋体][size=10.5pt]
n[i]ci[/i][/size][/font][font=宋体][size=10.5pt]×[i]V[/i][/size][/font][/color][/size]
[size=3][color=#000000][/color][/size][size=3][color=#000000][i][font=宋体][size=10.5pt]ω[/size][/font][/i][font=宋体][size=10.5pt]=
[/size][/font][font=宋体][size=10.5pt]　…… (2)[/size][/font][/color][/size]
[size=3][color=#000000][i][font=宋体][size=10.5pt]20m[/size][/font][/i][i][font=宋体][size=10.5pt][/size][/font][/i][/color][/size]
[i][font=宋体][size=10.5pt][size=3][color=#000000] [/color][/size][/size][/font][/i]
[size=3][color=#000000][i][font=宋体][size=10.5pt]n[/size][/font][/i][i][font=宋体][size=10.5pt]—[/size][/font][/i][font=宋体][size=10.5pt]为提取样液上清液体积数；[/size][/font][/color][/size]
[size=3][color=#000000][font=宋体][size=10.5pt]20[/size][/font][font=宋体][size=10.5pt]—液体提取剂体积数；[/size][/font][/color][/size]
[size=3][color=#000000][i][font=宋体][size=10.5pt]ω[/size][/font][/i][font=宋体][size=10.5pt]－样品中SEM 、AOZ 、AMOZ 、AHD残留量，μg/kg；[/size][/font][/color][/size]
[size=3][color=#000000][i][font=宋体][size=10.5pt]ci [/size][/font][/i][font=宋体][size=10.5pt]－标准曲线上查出试样溶液中SEM 、AOZ 、AMOZ 、AHD标准工作溶液的浓度，μg/L；[/size][/font][/color][/size]
[size=3][color=#000000][i][font=宋体][size=10.5pt]V[/size][/font][/i][font=宋体][size=10.5pt]－最终定容体积数，mL；[/size][/font][/color][/size]
[size=3][color=#000000][/color][/size][table=98%][tr][td][font=Times New Roman][size=3][color=#000000] [/color][/size][/font]

[/td][/tr][/table][size=3][color=#000000][i][font=宋体][size=10.5pt]m[/size][/font][/i][font=宋体][size=10.5pt]－供试试料样品重量，g。[/size][/font][/color][/size]
[size=3][color=#000000][font=黑体][b][size=10.5pt]6[/size][/b][b][size=10.5pt]、测定低限、回收率[/size][/b][/font][/color][/size]
[font=黑体][size=3][color=#000000][b][size=10.5pt]6.1[/size][/b][b][size=10.5pt]检测限[/size][/b][/color][/size][/font]
[font=宋体][size=10.5pt][size=3][color=#000000]本方法SEM 、AOZ 、AMOZ 、AHD的检测限均为1.0μg/kg。[/color][/size][/size][/font]
[font=黑体][size=3][color=#000000][b][size=10.5pt]6.2[/size][/b][b][size=10.5pt]回收率[/size][/b][/color][/size][/font]
[size=3][color=#000000][font=宋体][size=10.5pt]本方法[/size][/font][size=10.5pt][font=Times New Roman]SEM [/font][/size][font=宋体][size=10.5pt]、[/size][/font][size=10.5pt][font=Times New Roman]AOZ [/font][/size][font=宋体][size=10.5pt]、[/size][/font][size=10.5pt][font=Times New Roman]AMOZ [/font][/size][font=宋体][size=10.5pt]、[/size][/font][size=10.5pt][font=Times New Roman]AHD[/font][/size][font=宋体][size=10.5pt]回收率为[/size][/font][size=10.5pt][font=Times New Roman]:85%[/font][/size][font=宋体][size=10.5pt]～[/size][/font][size=10.5pt][font=Times New Roman]105%[/font][/size][font=宋体][size=10.5pt]。[/size][/font][size=10.5pt][/size][/color][/size]
[align=center][align=center][table=98%][tr][td][align=left][align=left][size=7.5pt][color=#000000][font=Times New Roman]AOZ[/font][/color][/size][/align][/align]
[/td][/tr][/table][table=98%][tr][td][size=7.5pt][color=#000000][font=Times New Roman]AHD[/font][/color][/size]

[/td][/tr][/table][table=98%][tr][td][size=7.5pt][color=#000000][font=Times New Roman]SEM[/font][/color][/size]

[/td][/tr][/table][table=98%][tr][td][size=7.5pt][color=#000000][font=Times New Roman]AMOZ[/font][/color][/size]

[/td][/tr][/table][font=宋体][size=10pt][color=#000000][font=Times New Roman][/font][/color][/size][/font][/align][/align][align=center][align=center][font=宋体][size=10.5pt][size=3][color=#000000]A3 鸡肉样品空白及2ug/kg添加色谱图[/color][/size][/size][/font][size=10.5pt][/size][/align][/align]

硝基呋喃代谢物检测ELISA方灵敏度为0.1PPB

民族生物科技新篇章-深圳绿诗源世界首家成功研制出四种硝基呋喃类代谢物检测试剂盒
   深圳市绿诗源生物技术有限公司暨率先研制出氟苯尼考（FF）ELISA快速检测试剂盒之后，又成功研制呋喃西林代谢物（SEM）检测试剂盒、呋喃唑酮代谢物（AOZ）检测试剂盒、呋喃妥因代谢物（AHD）检测试剂盒、呋喃它酮代谢物（AMOZ）检测试剂盒，成为世界上首家拥有四种硝基呋喃类代谢物检测试剂盒的生产商。Green Spring品牌试剂盒并通过用HPLC和LC-MS-MS方法对比验证. 测试结果表明Green Spring品牌的检测试剂盒测定结果与HPLC或LC/MS测定结果基本一致。且Green Spring品牌的检测试剂盒具有灵敏度高、特异性强、定量判定准、样本前处理简单、检测速度快等优点。这标志着中华民族生物科技又欣开了新的篇章--中国生物技术产业达到了国际领先水平。
   深圳绿诗源生物技术有限公司生产的Green Spring品牌的检测试剂盒技术先进，质量好，品种齐全。有：克伦特罗(Clenbuterol)快速检测试剂盒、氯霉素（CAP）快速检测试剂盒、氟苯尼考（FF）ELISA快速检测试剂盒、瘦肉精(Clenbuterol)快速检测试剂盒、莱克多巴胺（Ract)快速检测试剂盒、磺胺类（SAs）多残留快速检测试剂盒（ELISA方法）、磺胺间二甲氧嘧啶（SDM）快速检测试剂盒（ELISA方法）、链霉素(Streptomycin)快速检测试剂盒（ELISA方法）、庆大霉素快速检测试剂盒（ELISA方法）、泰乐菌素快速检测试剂盒（ELISA方法）、、青霉素G（BP）快速检测试剂盒（ELISA法）、恩诺沙星（Enrofloxacin）快速检测试剂盒（ELISA法）、磺胺喹噁啉（SQX）快速检测试剂盒（ELISA法）、克伦特罗（Cle)快速检测试剂盒（ELISA法）、磺胺二甲基嘧啶（SM2）快速检测试剂盒（ELISA法）等一系例的产品。公司将陆续推出四环素快速检测试剂盒、苏丹红快速检测试剂盒与检测试纸条等新产品，努力地为客户创造价值，为人类健康贡献力量，努力地使Green Spring品牌食品安全检测试剂盒、动物疫病诊断试剂盒打造成受政府单位与广大客户欢迎的民族生物技术品牌!

欢迎来电咨询：0755-28938075-805  13902998875 黄先生
[url=http://www.lsybt.com/]www.lsybt.com[/url]   [email=hyxiang01@yahoo.com.cn]hyxiang01@yahoo.com.cn[/email]



深圳市绿诗源生物技术有限公司

[[i] 本帖最后由 lsy01 于 2008-3-4 11:09 编辑 [/i]]

十分感谢楼主的分享，正需要呢。。。。。

硝基呋喃代谢物用试剂盒来检测，很方便，又能节约时间，稳定性也不错！每盒试剂盒里都有检测方法！具体怎么做，都写的很详细！我们用过北京陆桥和绿诗源的试剂盒！都还可以！绿诗源的相对来说比较便宜一些！

硝基呋喃类如果是只检测一两个项目的话，用试剂盒还是比较方便的，要是全部检测的话就得考虑一下了

谢谢了！挺有用的资料呢~~~~~~~~~

用ELISA检测吧

建议用德国拜发的，准确率可以跟MS媲美！

谢谢楼主,正需要.:)
我们公司不是这样作的不过

我们机构可以检测这个~~~~~~

我们公司有这种试剂盒，肯定比HPLC方法要检测、方便。价格也比其他公司的低。
操作简单，是很理想的初筛方法。
水产品的检测限：0.1ppb

已经用HPLC试验了一个多星期了，效果还是如此的不好。:Q