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tag 标签: 黄曲霉毒素

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分享 黄曲霉毒素B1酶联免疫试剂盒操作步骤
苏微微生物 2019-1-25 10:11
1. 将所需试剂及微孔板取出,放置室温( 20~25℃ ) 30min 以上,液体试剂使用前均须摇匀。 2. 取出所需数量的微孔板,将不用的微孔板放回铝箔袋中,放置于 2~8℃ 冷藏。不可冷冻。 3. 配置好的洗涤工作液在使用前也需回温。 4. 将样本和标准品对应微孔编号,建议每个样本和标准品做 2 孔平行,并记录标准孔和样本孔所在的位置。 5. 每孔加入 250μL 左右洗涤液,洗涤液不得溢出,放置 40s 左右,甩掉洗涤液,在吸水纸上拍干。 6. 分别加入 B 试剂(标准溶液) / 待测样液 50μL 到对应的微孔中,加入酶标抗原溶液 50μL/ 孔,轻轻震荡混匀, 遮盖后 37℃ 恒温培养箱中反应 30min 。 7. 小心揭开盖板,甩掉反应液, 加入 洗涤液 250μL/ 孔充分洗涤 5 次,每次间隔 40s ,用吸水纸拍干。 8. 分别加入 F 试剂(显色底物液 a )和 G 试剂(显色底物液 b )各 50 m L / 孔 ,轻轻震荡混匀, 遮盖后 37℃ 恒温培养箱中显色 15min 。 9. 加入 H 试剂(终止液) 50 m L/ 孔,轻轻震荡混匀,设酶标仪于 450nm 处读取每孔 OD 值。 ( 若无酶标仪,则不加终止用目测法可进行判定 ) 。
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分享 泰乐祺科技——莲子中黄曲霉毒素B1,B2,.G1,G2检测方案
ffanrapid 2013-2-18 10:10
莲子,其味清香,营养丰富。具有补脾、益肺、养心、益肾和固肠等作用。适用于心悸、失眠,体虚、遗精、白带过多、慢性腹症等症。莲子不仅是珍贵的保健食品,还是一味很有价值的中药材。但是近日得知:2012年2月23日,日本厚生劳动省医药食品局食品安全部监视安全课发布食安输发0223第2号和第5号:将中国产莲子中黄曲霉毒素(AF)由命令检查转为强化监控检查。 莲子多产于湖南、湖北、福建等南方温湿地区,其气候条件适宜黄曲霉的生长。黄曲霉毒素 (AF) 只有在湿度、温度适合及通风良好才会生成。 极有可能感染霉菌并产生黄曲霉毒素,进而对消费者的身体健康造成危害。由此可以推断喜爱食用莲子的人们很有可能已经食用了含有黄曲霉毒素的莲子,为了保护广大消费者的利益,有必要对莲子的AF的污染情况进行检测。 《中国药典》对部分中药材中 AFB1 的限量规定为 5 micro;g/kg, 黄曲霉毒素总限量为 10 micro;g/kg。 目前来讲,黄曲霉毒素AFT的检测方法有高效液相色谱法(HPLC),酶联免疫检测法等。液相色谱法可以精确的检测中药材中黄曲霉毒素的微小含量。而使用黄曲霉毒素 ELISA试剂盒则能够快速而准确的分析样品中黄曲霉毒素残留。 泰乐祺科技作为国内专业从事霉菌毒素检测技术与产品服务的供应商,泰乐祺检测应用实验室重点关注食品安全事件尤其是涉及霉菌毒素安全等问题,针对上述情况 , 提出了以下解决方案。 免疫亲和柱+KRC光化学柱后衍生法 1. 简介 PriboFast黄曲霉毒素B+G免疫亲和柱(编号IAC-010-3)可选择性吸附样品液中的毒素,从而对毒素样品起到非常针对性的纯化作用,然后用HPLC/FLD+KRC 柱后衍生系统 可以有效的测定黄曲霉毒素 B1、B2、G1、G2、浓度,提高检测的准确性和灵敏度。 2. 免疫亲和柱/KRC衍生法特点: • 采用高特异性的抗体。 • 柱容量高、柱体积大,稳定的纯化效率; • 柱内胶含量高,保证稳定的回收率; • 符合国内外限量标准 • 纯化后直接用于ELISA 法,高效液相色谱法,荧光光度法等。 • 适用于各种复杂基质样品处理 • 衍生化操作方便,光化学衍生化无需使用衍生试剂(通常电化学柱后衍生均需要使用衍生试剂,分析成本高,操作麻烦,仪器故障率较高)。 • 回收率高,达到90%以上 3. 免疫亲和柱法操作步骤简介: 1)样品处理 •准确称取25g粉状样品,溶于125ml甲醇/水(70/30)中; .加入5.0g氯化钠以均质器高速搅拌,提取2分钟; .4000r/min离心5min或用槽纹滤纸过滤; .取15mL滤液并加入30mL水稀释,用玻璃微纤维滤纸过滤; .取稀释后液体待测; .将免疫亲和柱连接于20.0mL玻璃注射器下。准确移取15.0mL样品提取液注入玻璃注射器; .将空气压力泵与玻璃注射器连接,调节压力使溶液以约6mL/min流速缓慢通过免疫亲和柱,直至2~3mL空气通过柱体; .以10.0mL水淋洗柱子2次,弃去全部流出液,并使2mL~3mL空气通过柱体; .准确加入1.0mL色谱级甲醇洗脱,流速为1 mL/min ~2mL/min,收集全部洗脱液于玻璃试管中,供检测用。 •2)测定:HPLC直接进样,经黄曲霉毒素专用色谱柱、KRC光化学柱后衍生化后 荧光检测器 直接记录并计算出黄曲霉毒素B1B2G1G2浓度; Pribofast KRC 柱后衍生器和 HPLC参数(符合GB23212-2008) PriboFast KRC-25 柱后光化学衍生器 紫外灯波长:254 nm HPLC- 色谱柱 :黄曲霉毒素专用色谱柱 150 x 4.6 mm; C-18 流动相:甲醇-水45:55 流 量: 1.0 mL/min 柱 温: 35 °C 进 样 体 积 : 20μL 荧光检测器: λ-激发波长:365nm λ-发射波长:455 nm 液相色谱仪检测配置; 高效液相色谱仪 带有荧光检测器; Pribofast KRC-25 柱后光化学衍生装置,配有纳米灯管254nm,25米FTFE线圈。 黄曲霉毒素专用色谱柱 C18 150 x 4.6 mm
个人分类: 北京泰乐祺科技——检测方案|349 次阅读|0 个评论
分享 柱后光化学衍生反应器
ffanrapid 2013-1-28 13:47
要准确测定黄曲霉毒素含量,需将黄曲霉毒素 B1 和 G1 衍生,提高其荧光强度。这种用于液相-荧光法测定黄曲霉毒素时进行柱后光化学衍生的装置。(又叫 柱后衍生装置 , 光化学衍生装置,光化学衍生器 )。光化学柱后衍生器可以在 254nm 下用光化学的方法对黄曲霉毒素 B1 和 G1 进行衍生,与电化学溴衍生方法是等同的。黄曲霉毒素 B2 和 G2 不受该衍生步骤的影响。 使用光化学柱后衍生器 可在线 实现 对黄曲霉毒素B1、G1进行衍生,不需要任何化学试剂。 光化学 在线衍生系统,不仅帮助您 获得重复性好的结果 ,还可以 帮助您 降低化学物质的污染和危害。 PriboFast 光化学柱后衍生器具有以下特点: o 无需使用化学物质(省钱的同时,也避免操作人员接触有毒化学物质); o 增加 HPLC 仪器的寿命(没有腐蚀性酸流经毛细管); o 无需冲洗步骤; o 结果与电化学方法(溴衍生)一致。 o 黄曲霉毒素 B1 、 B2 、 G1 、 G2 的最低检测限均小于 0.5PPB 。 o 符合 AOAC2005.08 , AOAC2008.02 , AOACAa11-05 ,中国台湾标准(食字 0981800370 号公告)和欧盟药典 2.8.18 标准分析方法。 o 符合中国国家标准和进出口检验标准 PriboFast 柱后光化学衍生反应器 仪器组成: o KRC-2525 米反应线圈 254nm 紫外灯及其灯架抛光支撑板 为应对最近国内出现的黄曲霉毒素的危机,帮助客户实现对黄曲霉毒素在线衍生和检测,有效提高检测效率,准确性,检测灵敏度以及实现高度重复性。我公司联合 Pribolab 公司联合推出光化学柱后衍生器免费试用活动,帮助客户将传统的溴碘衍生方式升级为较为先进的光化学柱后衍生系统,只要申请,就可免费享用一个月的在线光化学衍生装置,有兴趣、有需求的用户直接来电申请,我公司会有专人服务为您完成后续的试用申请,协助您在最快的时间内开展黄曲霉毒素检测项目。 我们热诚期待您的来电。 北京泰乐祺科技有限公司目前提供食品安全检测相关产品和技术服务,尤其专注于霉菌毒素分析系列产品和技术服务,依托国外先进技术为社会提供食品、饲料及饮料等的霉菌毒素、食品成分等检测分析服务。 ☆ 霉菌毒素检测技术咨询与产品服务 包括:标准品、标准参考物质(质控样品)、样品前处理净化柱和免疫亲和柱、ELISA试剂盒 ☆ 酶法生物分析试剂盒(液体装)及葡萄酒专用酶法试剂盒 ☆ 动物疾病金标检测卡和ELISA检测试剂盒 ☆ 农药、环境污染物质等样品前处理净化柱 ☆ 农兽药食品标准品以及固相萃取小柱、滤膜、针式过滤器等色谱耗材 ☆ 霉菌毒素、有机酸、糖类物质等检测分析 北京泰乐祺科技有限公司 www.rapid-bio.com 客服热线:400-688-5349 联系电话:010-63395349 63380700 13311089404
个人分类: 北京泰乐祺科技——仪器设备|389 次阅读|0 个评论
分享 实验室比对:玉米粉中黄曲霉毒素B1
sgsfood 2012-6-15 13:37
黄曲霉毒素在农作物中存在的形式包括黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2。其中黄曲霉毒素B1被国际肿瘤研究机构IARC列为IA类致癌物质。 鉴于黄曲霉毒素对人类及动物的毒害作用及其在国际贸易中产生的重要危害,截止到2003年,世界已有76个国家制定了食品中黄曲霉毒素总量AF(B1+B2+G1+G2)的限量标准。 为了帮助实验室自身对黄曲霉毒素检测能力准确评价和有效监督,SGS能力验证中心将开展玉米粉中黄曲霉毒素B1检测的能力验证计划,详细信息请见表1。 能力验证是实验室质量保证体系中的一个重要组成部分,参加能力验证活动是评价实验室测试水平,锻炼实验室人员技术能力,促进实验室认可及国际交流的重要手段。能力验证活动要求多个参加者在同一时间对专业机构提供的同一轮盲样中待测物的含量进行准确测试,并在规定的时间递交结果,参加者的最终结果采用Z值评估法进行评价。 SGS能力验证中心为英国皇家认可委员会(UKAS)认可的能力验证计划提供者(Proficiency Testing Provider),曾多次组织和开展国际、国内能力验证计划。 2012 年 SGS 能力验证中心开展玉米粉中黄曲霉毒素 B1 的实验室比对 样品代码Sample Code 测试项目Testing Item 测试类型Testing type 样品说明Description 样品量Weight 测试方法Testing method FC041 黄曲霉毒素B1 Aflatoxin B1 定量Quantitative 玉米粉 Corn flour 100g 不指定方法No specific method 开展时间:2012年7月12日,随样品寄出的相关资料包括: 1、分析报告单; 2、作业指导书; 3、客户确认表及确认函。 报告形式:SGS能力验证中心为所有参加者提供的报告共计三份,分别为: 1、中期报告; 2、能力验证技术评估报告; 3、个人报告。 联系人:田霞 电话:021-61072947 邮箱:ever.tian@sgs.com
个人分类: SGS新闻|358 次阅读|0 个评论

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