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[分享] 实验室微生物检测之换膜过滤法仪器

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(实验室真空泵)

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[LV.2]偶尔看看I

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发表于 2022-1-26 11:08 | 显示全部楼层 |阅读模式
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本帖最后由 石竹 于 2022-1-26 13:22 编辑

2015版药典更新后,对纯化水/注射用水的微生物检测做了更新,取消了之前两种培养基分别在不同环境下培养检测总菌和霉菌酵母菌操作步骤。简化了实验操作流程跟国际药典制药用水检测方法接轨。
       微生物限度中薄膜过滤法相较于传统的直接接种法,对液体样品中微生物检测占有很大的优势。菌落富集,菌落的恢复生长率及菌落形态分布等。根据不同的样品选用不同材质的滤膜,以达到最佳的富集效果。

滤膜:
       常用的滤膜材质大都为混合纤维素酯,由于醋酸纤维素和硝酸纤维素的混合物不具有生物活性,主要用于水溶液的过滤。根据药典规定滤膜孔径一般不大于0.45um,直径一般为47/50mm。市面上分为无菌包装即用型的滤膜和非无菌包装的滤膜。
       推荐使用无菌包装的滤膜,操作简单,减少二次污染的风险。

培养基:
       药典规定制药用水微生物检测用培养基。

制药用水采用的培养基原理如下:
• 培养基可以修复被氯气损伤的细菌,支持耐受氯气的微生物的生长。
• 培养基中的酵母浸出粉、蛋白胨、酸蛋白水解物提供氮源、维生素、生长因子;葡萄糖、为可发酵糖类;可溶性淀粉可以吸收菌在复苏过程产生的有害物质。
• 培养基中的丙酮酸钠可增强细菌的复苏。
• 培养基中的KH2PO4为酸碱缓冲剂,无水硫酸镁提供二价阳离子,琼脂为凝固剂。

过滤设备
过滤设备的选择要点:
• 操作简便,过滤速度快
• 易于清洁,方便消毒
• 避免死角,防止生物膜产生
• 制药企业选购需关注IQ和OQ验证

过滤杯的选择:
       培养结束后需立即计数,典型的菌落数为10-100个为最佳,每张滤膜的菌落数不得多于200个,避免造成堆叠和蔓延生长。

常见计数异常分析:

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