找回密码 注册
查看: 169|回复: 0

[分享] 关于检验分析的小经验(五)

[复制链接]
(虚拟的人生)

签到天数: 2101 天

[LV.Master]伴坛终老

2043

主题

2万

帖子

6万

积分

版主

Rank: 18Rank: 18

食坛巨匠勋章食品论坛版主勋章认证会员

发表于 2022-6-21 13:16 | 显示全部楼层 |阅读模式 |阅读模式 |发表于:云南省
分享:
关于检验分析的小经验(五)

120、HPLC如果流动相有缓冲盐时,更换流动相时务必先将缓冲盐更换掉,否则会将堵塞色谱柱。

121、也谈HPLC受温度的影响:我们的HPLC配置还是可以的,带柱温箱,不过环境温度对机器本身也是有很大影响的。做肽图时机器一开就是两三天,有一次夏天晚上实验室的中央空调停了,结果机器也罢工了。

122、再谈谈分子筛色谱柱的使用:一般而言分子筛色谱柱不如反相色谱柱的寿命长,有时维护不好做上两百多个样品就不行了,所以每次使用完一定要充分地用超纯水把盐冲洗干净,并且用0.05%的叠氮钠保存,一般冲洗两小时就可以了。曾经我们也低速冲洗过夜的,后来发现可能是水对硅醇基的影响反而降低了柱子的寿命,就改了。可以在软件上设置自动关泵,就不用人一直看着啦。

123、做HPLC时,样品稀释好后是需要过滤的,最好选用与生产使用的同等材质的滤膜,这样就不会产生偏差了。

124、做液相自己经常容易犯的错误:
1) 排气泡不彻底,柱子冲了半天都难以平衡;
2)更换流动相后,瓶子的体积忘记修改,结果不是进气泡就是中途强制停止运行;
3)走序列时,忘记勾选shut down,以致到了早上满堂红;
4)缓冲液的pH一定要调节准确,否则对RT很有影响的。

125、薄层色谱鉴别时,可以将展开剂放在双槽层析缸的一边,然后把点好的板子放在双槽的另一边饱和半小时候,然后再放在展开剂的一边展开,这样跑出来的点比较圆。

126、在一般的过滤溶液时,如果不好过滤,建议将溶液离心后用上清液过滤,也可以用抽滤,这样不会影响测定结果,也不浪费时间。

127、用HPLC法测物质有关物质时,样品放置的时间以及放置的温度极其重要,所以最好现用现配,或者配好的样品液一定要低温保存,条件允许的话可以加一个自动上样控温装置,这样可防止杂质的降解,保证结果准确度。

128、做HPLC时大多数都可以在泵头和管路连接处发现有白色的结晶出现。产生这种结晶的原因是使用了含缓冲盐的流动相后,对系统冲洗时间不够,管路中残留了少量的缓冲盐随流动相渗出造成的。如果有朋友发现相同的问题,只要延长冲洗时间就可以解决。

129、在做薄层时层析缸的气密性也很重要,新的层析缸最好在缸口涂点凡士林。3.做滴定时一定要注意所配溶液是否和以前的溶液的性状相同(如:颜色),如果不同就要考虑试剂、溶剂和器皿是不是变质或被污染了。

130、做紫外时因重视仪器的预热时间,预热时间太短,对实验结果的影响很大。

131、我看到有很多实验员在配置薄层板的CMC-Na溶液时喜欢加热,使其快速完全的溶解。这样做有一个很大的弊端,制作出来的薄层板是非常不平滑的,建议还是让其自己慢慢溶解,即时不能完全溶解,也可以使用。

132、岛津的HPLC-10A的部分仪器对乙腈非常敏感,如果流动相中含有大量的乙腈时因逐步过度,否则会产生漏液或压力不稳定。

133、做HPLC时使用低波长时,水的纯度要求要比高波长要高一些。比如210nm以下波长检测时。

134、进行TOC测定的时候,环境因素是影响测定结果最大的因素。
1)取样的瓶必须是干净的,就是洗好的瓶子,必须远离空气中有机试剂浓度较大的房间,如果不能避免,就应当放置在相对密闭的柜子里;
2)在样品的转移过程中,选择空气质量好的房间,若在配置过程中,房间里有有机试剂的存在,检验结果绝对不是样品真实的值。
做薄层的时候,如果用的不是预置板,建议最好把边上的部分刮去,防止边缘效应,对定量的结果会有很大的帮助。

135、HPLC中流动相中加了三乙胺可以减小拖尾,关键是pH值。

136、用液相测含量时,因每次配制的流动相有差异,按标准配制的流动相,有时峰分不开,可以适当调整比例,改善效果。

137、抗生素的效价测定时 加菌量一定要准确 否则结果会相差很大 不建议使用10ml的刻度吸管2.无菌实验时,HTY601集菌仪使用之前先观察集菌培养器的软管走势是否顺畅,这时不宜使用太小的转数,因为很容易挤断软管,大约在70转数即可。

138、0.05M磷酸氢二钠250毫升与250毫升乙腈互溶后有白色絮状沉淀,后超声逐渐溶解变澄清。

139、做氢氧化钠的氯化物检查时,先要将其用稀硝酸调节PH,否则结果很不准确!

140、在使用全自动电子天平时,尤其是十万分之一的天平,很容易发生读数飘移。在称量过程中,注意关好门窗,确保称量环境的安静,在天平的不需加样的一侧用一本厚重的文件夹挡住,会有利于维护环境的稳定。

141、做马来酸氯苯那敏的有关物质的时候,采用气相法,样品的溶剂峰旁边会出来一个大峰,此峰在对照品中并无出现,容易疑惑是杂质并判断为超标,实际此峰是马来酸的峰,即马来酸氯苯那敏进样后会分解成马来酸与氯苯那敏两个峰。在做判断时不止应扣除溶剂峰,还应扣除马来酸峰。这样才是真正结果。

142、若离心的方法损失有效成分较多,则可以选择冷置一夜,可以节省能源呵。

143、绿原酸对照品的溶液很不稳定,最好现配现用。

144、在做液相时候,如果保留时间不一致,看看室内温度变化情况,还有就是你要是手动进样时,进样速度也有关系!

145、我们在做不同厂家同一原料药的熔点时发现该原料药的熔点均不符合规定,在查找原因时,我们发现是介质硅油的原因。因为在测定熔点前看到介质硅油很脏了,里面有很多黑色浮游物,我们用棉花对其进行了过滤,硅油是清了,但测出的熔点数据错了。换了新的硅油,熔点正常。

146、做液相时如果流动相有缓冲盐,一定要注意你的色谱柱的冲洗。不然峰的分离度不好。

147、以前取清膏都是用灭菌后的锥形瓶,现在直接有用移液管抽取10mL到配制灭菌好的缓冲液中,菌检结果还很好,免得清膏黏糊黏糊的难得清洗。

148、做快速水分法时,连续测定样品,须等温度降下来后再加样,否则在加样过程中受热水分蒸发造成结果偏低。
149、检测硫酸阿米卡星的硫酸盐,要求在紫色开始消失的时候加50mL乙醇,可是开始消失的点不好判断,一般是在加了5mL多EDTA滴定液之后就加乙醇,滴定结果一般消耗7-8mL,加的太晚有时候很难出终点。

150、点样之前先将薄层板活化一下,能够使结果更加优化,我通常放在烘箱里烤5分钟,再取出放冷。另外,展开剂应尽量精确,尤其是比例比较接近的是放在110℃烘箱烘30min,我觉得不应该等到放冷,立马就可以点样,原因:
1)刚活化的板温度高,散热快;
2)放冷的过程种很容易吸潮。

151、做HPLC的时候,要是流动相中含有盐晶离子,那冲柱子的时候一定要有水先冲一次(水:蒸馏水超升的),再用30%的甲醇冲洗,最后用甲醇冲洗。

152、在测比重的时候,温度对结果的影响很大,以前不是很注意,现在基本上都放在20摄氏度的水浴锅中一段时间再测。
153做紫外的过程中,要注意石英比色皿,如果不干净的话,也千万不能用超声来清洗,可以用甲醇和稀硝酸的混合液来浸泡,并且用时要认准石英比色皿两个光滑面(保证光从有S的一个光洁面入射)。
154、做HPLC的时候,走空白时,发现不停的有杂质峰出现,用流动相无法冲洗干净,可能是进样器,可能是泵,可能是柱子被污染了,可以用色谱级的异丙醇冲洗系统24h以上。

文章来源食品实验室服务。

正确喝水: 1每天早晨喝一杯温开水清肠 2喝热水:微烫嘴,是减肥的 3喝温热水:是排毒的 4喝凉水:是增肥的 凉水会使脂肪变硬 5从现在开始 改变喝水的方式: 水,你喝对了吗?
回复

使用道具 举报

您需要登录后才可以回帖 登录 | 注册

本版积分规则

联系方式|小黑屋|手机版|Archiver|版权声明|隐私协议|食品伙伴网

GMT+8, 2022-8-15 08:21 , Processed in 1.618738 second(s), 17 queries , Gzip On, Memcache On.

Powered by Discuz! X3

© 2001-2022 Comsenz Inc. 鲁公网安备 37060202000128号

快速回复 返回顶部 返回列表