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[分享] 大肠菌群LST灭均后小导管不再有气泡(36楼有补充说明)!

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发表于 2009-5-20 10:25 | 显示全部楼层 |阅读模式
大肠菌群(大肠杆菌)检测实验培养基(LST)灭菌时,偶尔会有小气泡留在小导管内,导致培养基不能使用。重复灭菌不仅费时费电,还会破坏培养基的成分。为了避免问题的发生,本人根据实验经验和严密思考做出几种原因分析,并给予解决的办法.

[ 本帖最后由 caizhong07048 于 2009-9-9 09:43 编辑 ]

LST灭菌失败原因分析.doc

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发表于 2009-5-20 10:41 | 显示全部楼层
真好呀,很详细,有心人!
决定了,我要做个快乐的人!
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 楼主| 发表于 2009-5-21 08:40 | 显示全部楼层
奇怪了,现成的答案都没人要,求助贴里面还那么多人议论纷纷
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(多请教)

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食坛骨干

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发表于 2009-5-21 09:15 | 显示全部楼层
我下载了,支持楼主。
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发表于 2009-5-21 10:12 | 显示全部楼层
多谢楼主了!太有心了!
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 楼主| 发表于 2009-5-21 10:36 | 显示全部楼层
来个不用下载的。
**原因一:过早打开灭菌锅
当灭菌锅压力表示数为0而温度表示数还高与室温时,不要打开灭菌锅。因为打开锅盖瞬间,锅内大量热量散出,温度突然降低,试管内温度也随着降低,导致管内气减小,沸点降低,部分水会汽化留在小导管内。
解决办法:等灭菌锅内气压和温度都降到与室温一致或相差不大时再打开灭菌锅。
**原因二:试管塞塞得太紧(使用硅胶塞的时候)
      试管塞塞得太紧在灭菌时会导致试管内与灭菌锅内压力不一致。在灭菌锅升温升压时,锅内压力会大于管内压力;灭菌锅降温降压时,锅内压力小于管内压力。锅内压力会大于管内压力时,试管内压力不够,不能将小导管内气体排尽,就留有气泡;锅内压力小于管内压力时,可能会使试管塞和培养基崩出,培养基报废。
      解决办法:改用透气性好的棉花塞,切勿使用橡皮塞。
*原因三:小导管口太小
      我们可以把一根毛细管一端封口,另一端插进水里,毛细管里怎么都不会进水。同样把一个烧杯倒扣进水里就很容易进水了。小导管在加压后一方面水要进去,另外里面的空气要出来,如果口太小的话,空气不容易出去,水也不容易进来,就会导致气泡六在里面了。
      解决办法:改用内空较大的导管,尽量使用V型管,不要使用锥型管。
原因四:培养基质量引起
      由培养基质量引起的气体不能排尽或培养基含有高温高压分解产气的成分。灭菌时用水做培养基组的对照试验,若培养基组有气泡,而对照组没有气泡,可确定是有此原因引起。
解决办法:改用其它培养基。
原因五:灭菌锅工作压力不够,使气体不能排尽
      灭菌锅最大压力不够不能使管内液体强行把气体挤出,最后还留有小气泡,还会使温度上升缓慢,或达不到灭菌温度。此原因的可能性较小,我们可以在排除原因一、二、三、四的情况下,用不加试管塞、大口导管做试验,若还仍不能达到效果,就要检查灭菌锅了。
      解决办法:修理灭菌锅。

以上原因均经实验证实可靠,欢迎补充!


注意事项:1  * 为主要原因。
          2  不要将试管倒置,以免试管口和试管塞受培养基污染。
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发表于 2009-5-21 11:07 | 显示全部楼层
谢谢各位有心人的帮忙解答,本人回去后针对各种产生原因再好好排查一下吧。
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发表于 2009-5-21 13:52 | 显示全部楼层
楼主有心呀~~呵呵~~不过用棉花我还是照样会这样~~
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发表于 2009-5-21 15:00 | 显示全部楼层
好东西啊,实在是好啊!
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 楼主| 发表于 2009-5-21 16:02 | 显示全部楼层

回复 8# zhizi_1801 的帖子

那很有可能是原因一或三,这个我都实验过的,你也可以对照着试下
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预备会员

发表于 2009-5-22 09:45 | 显示全部楼层
原因三还真没注意到,楼主想的真是细呀
我想要飞呀却飞不高
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发表于 2009-5-22 11:06 | 显示全部楼层

支持置顶!

建议版主置顶。虽然是小问题,但发现普遍性很高。我也遇到同样问题,新购国产自动灭菌锅排凉气不充分,经调节排气量基本解决小气泡问题。同时也不能理解,近2万元的锅,应该达到进口锅的傻瓜(自动)水平,却偏要整个阀让用户动动手,体验“当家作主的权利”。
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