近期，进出口食品卫生检测中越来越多地要求单增李斯特的检测，许多食品企业化验室也开始或准备开始进行这个项目的检测。
    为了配合企业化验室进行开展单增李斯特的检测，我们食品大讲堂决定举办一起“食品中单增李斯特检测技术”的专题讨论。
    这次专题讨论由我主持，邀请梦迪坛友协助。时间从9月24日到9月30日。
    欢迎大家参加讨论。

    预计安排是HACCP斑竹在国庆节后主持一次国内外HACCP体系的讨论，不过，距离国庆节还有一个周的时间，大讲堂不利用起来怪可惜的，加之论坛中有朋友在讨论李斯特检测的问题，因此临时起意，就举行一个李斯特检测的专题讨论吧。
    这个不算是个讲座，算是个讨论，希望和大家在这个周的时间中，就单增李斯特检测方面的一些问题，进行广泛的交流。
    我手中的许多资料，有许多是从论坛中朋友那里得来的。

李斯特氏菌属包括七个种：
单核细胞增生李斯特氏菌
绵羊李斯特氏菌
英诺克李斯特氏菌
威尔斯李斯特氏菌
西尔李斯特氏菌
格氏李斯特氏菌
默氏李斯特氏菌。
其中单核细胞增生李斯特氏菌对人类致病性强，绵羊李斯特氏菌对人类也有一定的致病性，其余李斯特氏菌无致病性。

多谢坛主foodmate老师对我的信任，不胜荣幸能与大家共同讨论这个问题。
希望我们能够共同学习，共同进步！

单核细胞增生李斯特氏菌是一种人畜共患病的病原菌。
它能引起人畜的李氏菌的病，感染后主要表现为败血症、脑膜炎和单核细胞增多。
它广泛存在于自然界中，食品中存在的单增李氏菌对人类的安全具有危险，该菌在4℃的环境中仍可生长繁殖，是冷藏食品威胁人类健康的主要病原菌之一，因此，在食品卫生微生物检验中，必须加以重视。

　该菌为革兰氏阳性短杆菌，大小约为0.5μmх1.0-2.0μm,直或稍弯，两端钝圆，常呈V字型排列，偶有球状、双球状。
    兼性厌氧、无芽胞，一般不形成荚膜，但在营养丰富的环境中可形成荚膜，在陈旧培养中的菌体可呈丝状及革兰氏阴性。
    该菌有4根周毛和1根端毛，但周毛易脱落。
    该菌营养要求不高，在20--25℃培养有动力，穿刺培养2－5天可见倒立伞状生长，肉汤培养物在显微镜下可见翻跟斗运动。      
    该菌的生长范围为2--42℃（也有报道在0℃能缓慢生长），最适培养温度为35--37℃，在pH中性至弱碱性（pH9.6）、氧分压略低、二氧化碳张力略高的条件下该菌生长良好，在pH3.8－4.4能缓慢生长，在6.5% NaCl 肉汤中生长良好。
    在固体培养基上，菌落初始很小，透明，边缘整齐，呈露滴状，但随着菌落的增大，变得不透明。
    在5-7%的血平板上，菌落通常也不大，灰白色，刺种血平板培养后可产生窄小的β-溶血环。
   在0.6%酵母浸膏胰酪大豆琼脂(TSAYE)和改良Mc Bride(MMA)琼脂上，用45度角入射光照射菌落，通过解剖镜垂直观察，菌落呈兰色、灰色或兰灰色。
   该菌触酶阳性，氧化酶阴性。
   发酵多种糖类，产酸不产气。
   如发酵葡萄糖、乳糖、水杨素、麦芽糖、鼠李糖、七叶苷、蔗糖（迟发酵）、山梨醇、海藻糖、果糖。
   不发酵木糖、甘露醇、肌醇、阿拉伯糖、侧金盏花醇、棉子糖、卫矛醇和纤维二糖。
   不利用枸橼酸盐，40%胆汁不溶解。
   吲哚、硫化氢、尿素、明胶液化、硝酸盐还原、赖氨酸、鸟氨酸均阴性。
   VP、甲基红试验和精氨酸水解阳性。
　 该菌对理化因素抵抗力较强。 在土壤、粪便、青储饲料和干草内能长期存活。
   对碱和盐抵抗力强，60-70℃经5-20min可杀死，70%酒精5min、2.5%石炭酸、2.5%氢氧化钠、2.5%福尔马林20min 可杀死此菌。该菌对青霉素、氨苄青霉素、四环素、磺胺均敏感。
    李斯特氏菌(Listeria)是条件致病菌，大多为散发病例，也可因污染食品而爆发。　
    本菌能产生一种溶血素性质的外毒素。能引起人和牛、绵羊等动物的脑膜炎，可使家兔豚鼠等实验动物感染引起血中单核细胞增高。
　　可引起婴儿及新生儿的化脓性脑膜炎或脑膜脑炎，死亡率可达70%。子宫内感染的新生儿可导致新生儿李斯特氏菌病、流产、死胎或习惯性流产。

李斯特菌前两年某个牌子的雪糕在香港被查出来有此菌，加上香港传媒的报道才有印象。后来雪糕也少吃了。

我先把我手中的一些资料发上来，大部分是我过去讲座的资料。然后我们再开展一些讨论。
梦迪朋友正在做李斯特的检测，有点经验，也有些问题，希望和大家一起交流。
我刚才还看到空心帅朋友在微生物论坛发了一个帖子，也是关于李斯特的。

引用:

下面引用由格格巫在 2004/09/24 10:33pm 发表的内容：
李斯特菌前两年某个牌子的雪糕在香港被查出来有此菌，加上香港传媒的报道才有印象。后来雪糕也少吃了。

李斯特的危害在于其低温生长，这样在冷藏食品中就容易发生危险。
与李斯特菌危害有关的食品主要包括：
Ready to Eat Meat Products 即食肉制品
Cold Cuts, Hot Dogs, Sausages, etc.冷切，热狗，香肠等。
Soft Cheeses 软奶酪
Feta, Brie, Camembert, or blue-veined varieties
Raw Milk 鲜奶
Cole Slaw 生菜色拉

下面我按照标准大体讲解一下。
SN 0184-93 出口食品中单核细胞增生李斯特氏菌检验方法
Method for the examination of Listeria monocytogenes in food for export
样品：冷冻样品，2－5℃解冻，不超过18h
      若不能及时检验，应置于－15 ℃保存。
      非冷冻易腐样品应尽可能及时检验。
      若不能及时检验，应置于4 ℃冰箱保存，在24h之内检验。
两次增菌：
    巴氏消毒乳、乳制品、冷冻水产品、冻肉及其它加工食品应该前增菌。
    25g＋225ml改良缓冲蛋白胨水，均质。
    30 ℃培养18－24h，移取1ml接种于100ml增菌培养液（EB)中，30 ℃培养24、48h，分别进行分离。
直接增菌：
    生乳、鲜肉以及未经加工处理过的样品。
    25g＋225ml 增菌培养液，30 ℃培养24和48h，分别进行分离。

分离：
划线接种于MMA或者OXA平板，35 ℃培养24－48h。
斜射光镜检。

这个照片不好，哪位朋友友好的照片，欢迎提供。
MMA平板：
蓝色或者兰灰色，
扁平圆润，稍有凸起，
边缘整齐，
菌落较小，约为0.5mm左右。