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日志

摘抄2

已有 649 次阅读 2009-6-3 21:02 | , , ,

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   1、高效液相色谱

   

    按其固定相的性质可分为高效凝胶色谱、疏水性高效液相色谱、反相高效液相色谱、高效离子交换液相色谱、高效亲和液相色谱以及高效聚焦液色谱等类型。用不同类型的高效液相色谱分离或分析各种化合物的原理基本上与相对应的普通液相层析的原理相似,其不同之处是高效液相色谱灵敏、快速、分辨率高、重复性好,且须在色谱仪中进行。

   2、液相色谱中峰出现拖尾或出现双峰的原因

 

  (1)筛板堵塞或柱失效,解决办法是反向冲洗柱子,替换筛板或更换柱子。

  (2)存在干扰峰,解决办法为使用较长的柱子,改换流动相或更换选择性好的柱子。

   

      3、HPLC分析时保留时间变化

 

 (1)       柱温变化柱恒温,必要时需配置恒温箱。

 (2)       等度与梯度间未能充分平衡,至少用10倍柱体积的流动相平衡柱。

 (3)       缓冲液容量不够,用25mmol/L的缓冲液。

 (4)       柱污染,每天冲洗柱。

 (5)       柱内条件变化,稳定进样条件,调节流动相。

 (6)       柱快达到寿命采用保护柱。

  

  4、 HPLC分析时,柱压不稳定的原因及解决办法

 

 (1)        泵内有空气,解决的办法是清除泵内空气,对溶剂进行脱气处理。

 (2)        比例阀失效,更换比例阀即可。

 (3)        泵密封垫损坏,更换密封垫即可。

 (4)        溶剂中气泡,解决的办法是对溶剂脱气,必要时改变脱气方法;

 (5)        系统检漏,找出漏点,密封即可。

 (6)        梯度洗脱,这时压力波动是正常的。

 

 5、 影响实验检测结果因素

   

    决定实验检测结果正确性和可靠性的因素很多,至少包括:①人员;②设备;③试  剂 及易耗品等;④方法及其确认;⑤设施、环境条件;⑥测量溯源性;⑦抽样及样品处置等。

    以上因素对不同检测的结果正确性和可靠性和影响程度是不同的。所以,实验室在制定检测方法和程序、培训和考核人员以及选择和校准所用的仪器设备时应考虑到这些因素,针对特定检测工作的特点,分析确定其关键控制点,确保结果的准确性和可靠性。


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