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日志

常用微生物培养基成份,制法及用途

已有 1924 次阅读 2007-10-9 13:45 |个人分类:培养基 |

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1、营养琼脂(普通琼脂)

成份:牛肉浸液(或其它浸液,消化液或肉膏汤)   100毫升

      琼脂(视天气,琼脂质量而定)

制法:将上物加热溶解,补足水,调ph至7.6,过滤分装121℃,高压灭菌15分钟。

用途:作普通琼脂平皿。

 

2、血琼脂平板(BA)

制法:取营养琼脂(PH7.6),加热使其溶解待冷至45-50℃,以灭菌操作于每100毫升营养琼脂加灭菌脱纤维羊血或兔血5-10毫升,轻轻摇匀,立即倾注于平板或分装试管,制成斜面备用。

用途:1. 一般棉拭子均接种此培养基。

      2.尿液,脓液

      3.分离细菌标本用。

 

3、基础培养基 (肉膏汤BB)

成份:蛋白胨 10克     牛肉膏   5克  

      氯化钠   5克     水     1000毫升

制法:将以上各物称好,加水煮沸溶解,用1NNOH校正PH至7.6,过滤分瓶,121℃高压灭菌,20分钟备用。

用途:1 作耐药试验,增菌用分装小管。

      2 作普通琼脂斜面。

 

4、血液培养基(大管肉汤培养基)

成份:1 新鲜牛肉浸液   1000毫升   

      2 PABA(对氨基苯甲酸〔相当于10mg/毫升〕)   1g% 1毫升

      3 MgSO4   [相当于0.493/100毫升]       49.3% 1毫升

      4 枸椽酸钠                         0.3g

制法:1 将1号,4号混合液,2号,3号液分装高压灭菌。

      2 取灭菌1,4号混合液用无菌法加入PABA,MgSO4,再分管,行无菌试验三天方可使用。

用途:作血,骨髓培养用。

 

5、肠道杆菌培养基(伊红美兰琼脂)

成份: 蛋白胨   10克         乳糖     10克

        氯化钠   5克         琼脂     25(22)克

        水       1000毫升     2%伊红溶液20毫升

        0.5%美兰溶液   20毫升

制法:将蛋白胨,氯化钠琼脂称好,加水1000毫升使溶解,校正PH7.4过滤,补足失水,加入2%伊红溶液20毫升,0.5%美兰溶液20毫升,(115℃高压20分钟),冷却至50℃左右倾注平板,凝固后存冰箱备用。(高压以后方可再加乳糖)

 

用途:用作分离沙门氏,志贺氏菌属,也作菌群调查。

                          1

 

6、罗文斯坦培养基

成份:磷酸二氢钾     2.4克         硫酸镁   0.24克

      枸椽酸钠       0.6克         天门冬素 3.6克

      纯甘油(丙三醇) 12毫升         水     600毫升

      马铃薯粉       30克           鸡蛋   1000毫升(约3公斤)

      2%孔雀绿水溶液 20毫升    

制法:1 除鸡蛋外(还有孔雀绿)。可将其它物品称好,放入大三角瓶包扎好,高压灭菌。

      2 鸡蛋用75%酒精泡30分钟,灭菌法打蛋,倒入盛有玻璃珠的灭菌三角烧瓶内充分将鸡蛋摇散。

      3 将各成份按比例配好,分装每管约5毫升。

      4 间歇灭菌第一次90℃1小时,第二次80℃半小时,第三次80℃半小时(或放85℃烤箱内连续二次)。

质控标准: 1 灭菌试验合格。

            2 接种结核杆菌要求两星期生长良好。

用途:作结核分枝杆菌培养用。

 

7、结核半固体培养基

成份:磷酸氢二钠       19克           硫酸镁     0.6克

      磷酸二氢钾       2.5克         天门冬素   5克

      1%孔雀绿       1.5克           甘油       20毫升

      吐温80(10%) 5毫升           水       1000毫升

      枸椽酸钠         2.5克           动物血清   100毫升

      琼脂           1.5克(80小时用甲醇去脂)

      1%孔雀绿       0.78毫升       吐温80(10%) 5毫升

      加动物血清     100毫升

制法: 1 除血清外将上述药品均称好,放入煮沸溶解,调PH7。2

      2 分管(每管约10毫升)包扎好,高压,121℃半小时灭菌。

      3 待冷后无菌法加无菌血清(绵羊血或兔血)每管约1毫升备用。

      4

去除琼脂方法:取琼脂若干或于三角烧瓶中加甲醇于琼脂1毫升用塞密封,放37℃温浴80小时,每天摇动一次,冷却后到时取出用滤纸过滤,待琼脂自然冷却后备用。

质控标准:1无菌实验合格。

          2琼脂硬度合适而清亮。

          3接种标准结核杆菌用,强度合适即可用。

用途:培养结核杆菌用。

 

8、亚碲酸钾血琼脂平板

成份:琼脂基础   100毫升       1 0%葡萄糖     2毫升

      1%亚碲酸钾 4.5毫升       绵羊血       10毫升

制法:1将琼脂基础溶解好,加入羊血。

      2马上加热使成咖啡色后,稍冷再加入10%葡萄糖2毫升与1%亚碲酸4.5毫升混合后倒入无菌平板,凝固后存冰箱备用。

质控标准:接种白喉杆菌生长良好,其它革兰氏阴性菌均抑制生长。

用途:供培养及鉴别白喉杆菌用。      

 


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