日志
冰激凌产品中使用新旧版国标检验大肠菌群的结果对比
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目的：2008版的微生物检测国标等效采用了FDA的BAM及AOAC的方法，其中大肠菌群的检测方法发生了较大改变，由三步发酵法改成了两步发酵法。为了评估检测方法改变后对冰激凌产品检测结果的影响，我们针对不同产品进行了90组结果对比，通过结果统计，证明针对冰激凌产品08版的微生物检测国标比03版的国标更加敏感。
定义：大肠菌群并非细菌学分类命名，而是卫生细菌领域的用语，它不代表某一个或某一属细菌，而指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌，这些细菌在生化及血清学方面并非完全一致，其定义为：需氧及兼性厌氧、在36℃/37℃能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。一般认为该菌群细菌可包括大肠埃希氏菌、柠檬酸杆菌、产气克雷白氏菌和阴沟肠杆菌等。
样品与培养基：
样品：实验所选样品均为按照产品不同类别随机挑选。
培养基：实验所选用的培养基为北京陆桥技术有限公司生产，主要培养基为乳糖胆盐发酵培养，CM108（03版国标）；月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤 CM102（08版国标）。
实验设计：
1.
所有样品采用两种方法同时进行平行检测，结果判读后进行数据统计。
2.
因为两种方法的结果表达不同：03版国标为MPN/100克，08版为MPN/克。为了保证实验的准确性与可比性，试验中取样量均为1g*3，0.1g*3，0.01g*3。结果表达统一选用MPN/100克，将08版国标中MPN/克从理论上乘以100做对比。
结果统计：
冰激凌产品：共检测71个样品。
使用新版国标检测结果比旧版结果高的样品有45%，其中11个样品有显著差异，比例为15.5%。
水冰产品：共检测19个样品
使用新版国标检测结果比旧版结果高的样品有42%，大多数样品检出结果较低，并无显著差别。其中2批有显著差别，比例为10%。
结果讨论:
1.
针对所检测的样品，2008版的国标比2003版的国标更加敏感。尤其是冰激凌产品，当产品中含有较多大肠菌群时，两个方法会有显著差异。
2.
当样品中含有极少或者不含有大肠菌群时，二者的结果没有显著差异。
3.
因为大肠菌群的检测原理是判断样品能否发酵乳糖产酸产气，并且为革兰氏阴性短杆菌，检测关键为第一步选择性乳糖发酵培养。二种方法的关键不同是第一步培养中所选用的生物抑制剂不同。
在03版国标中，乳糖胆盐发酵培养基所选用的抑制剂为胆盐；在08版国标中，所选用的抑制剂为月桂基硫酸钠。胆盐是取自于动物的胆囊是一种生物制剂，月桂基硫酸钠是一种化学合成试剂。相对而言，月桂基硫酸钠比胆盐更加稳定。并且二者对菌群的抑制范围不同，这会导致在同一样品中检测结果不同。
4.
这次大肠菌群的检测国标改变后，其结果表达发生了改变，而相应的很多产品卫生标准并未同时更新。在检测时如何选择方法仍需进一步讨论。
5.
因为抑制剂的改变，很多材料或者产品的检测结果会发生差异，尤其是本身因来源或者工艺中较容易含有大肠菌群的产品。从理论上讲，某种材料中所可能含有的菌群一般相对稳定，为了进一步了解更换方法后对检测结果的影响，按产品类别做一些对比实验仍是必要的。根据检测结果和产品类别也需要重新修订相关卫生标准。
定义：大肠菌群并非细菌学分类命名，而是卫生细菌领域的用语，它不代表某一个或某一属细菌，而指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌，这些细菌在生化及血清学方面并非完全一致，其定义为：需氧及兼性厌氧、在36℃/37℃能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。一般认为该菌群细菌可包括大肠埃希氏菌、柠檬酸杆菌、产气克雷白氏菌和阴沟肠杆菌等。
样品与培养基：
样品：实验所选样品均为按照产品不同类别随机挑选。
培养基：实验所选用的培养基为北京陆桥技术有限公司生产，主要培养基为乳糖胆盐发酵培养，CM108（03版国标）；月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤 CM102（08版国标）。
实验设计：
1.
所有样品采用两种方法同时进行平行检测，结果判读后进行数据统计。
2.
因为两种方法的结果表达不同：03版国标为MPN/100克，08版为MPN/克。为了保证实验的准确性与可比性，试验中取样量均为1g*3，0.1g*3，0.01g*3。结果表达统一选用MPN/100克，将08版国标中MPN/克从理论上乘以100做对比。
结果统计：
冰激凌产品：共检测71个样品。
| 旧版方法未检出，新版方法检出 |
12 |
17% |
| 新版方法结果比旧版高 |
20 |
28% |
| 新版与旧版均未检出 |
27 |
38% |
| 旧版方法结果新比版高 |
12 |
17% |
使用新版国标检测结果比旧版结果高的样品有45%，其中11个样品有显著差异，比例为15.5%。
水冰产品：共检测19个样品
| 旧版方法未检出，新版方法检出 |
3 |
16% |
| 新版方法结果比旧版高 |
5 |
26% |
| 新版与旧版均未检出 |
6 |
31% |
| 旧版方法结果新比版高 |
5 |
26% |
使用新版国标检测结果比旧版结果高的样品有42%，大多数样品检出结果较低，并无显著差别。其中2批有显著差别，比例为10%。
结果讨论:
1.
针对所检测的样品，2008版的国标比2003版的国标更加敏感。尤其是冰激凌产品，当产品中含有较多大肠菌群时，两个方法会有显著差异。
2.
当样品中含有极少或者不含有大肠菌群时，二者的结果没有显著差异。
3.
因为大肠菌群的检测原理是判断样品能否发酵乳糖产酸产气，并且为革兰氏阴性短杆菌，检测关键为第一步选择性乳糖发酵培养。二种方法的关键不同是第一步培养中所选用的生物抑制剂不同。
在03版国标中，乳糖胆盐发酵培养基所选用的抑制剂为胆盐；在08版国标中，所选用的抑制剂为月桂基硫酸钠。胆盐是取自于动物的胆囊是一种生物制剂，月桂基硫酸钠是一种化学合成试剂。相对而言，月桂基硫酸钠比胆盐更加稳定。并且二者对菌群的抑制范围不同，这会导致在同一样品中检测结果不同。
4.
这次大肠菌群的检测国标改变后，其结果表达发生了改变，而相应的很多产品卫生标准并未同时更新。在检测时如何选择方法仍需进一步讨论。
5.
因为抑制剂的改变，很多材料或者产品的检测结果会发生差异，尤其是本身因来源或者工艺中较容易含有大肠菌群的产品。从理论上讲，某种材料中所可能含有的菌群一般相对稳定，为了进一步了解更换方法后对检测结果的影响，按产品类别做一些对比实验仍是必要的。根据检测结果和产品类别也需要重新修订相关卫生标准。
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