细胞脂质组学分析方法

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一、代谢物样品的制备
（1）细胞加药培养24 h后，更换新培养基培养2h ;
（2）添加预冷甲醇（80%v/v，−80°C）并将细胞在−80°C下培养20分钟；
（3）利用细胞刮刀将细胞取下，通过离心去除细胞碎片后，将上清液冷冻干燥并在−80°C下储存以备进一步测试。
二、脂质样品的制备（以6孔板为例）
（1）将细胞用胰酶消化后与300μL冷甲醇混合并转移到5 mL管中，涡旋20s；
（2）加入1ml 甲基叔丁基醚 (MTBE) 混合后，涡旋5min;
（3）随后加入250μL的水以形成相分离；
（4）在4℃下平衡10 min后，将混合物在4000 g下在4℃下离心5 min；
（5）收集上层并在氮气下干燥以进行LC-MS分析。
三、QE检测