超高效液相色谱-串联质谱法测定猪尿中12种禁用兽药残留

王中泰

超高效液相色谱-串联质谱法测定猪尿中12种禁用兽药残留

摘要

研究建立了超高效液相色谱-串联质谱测定猪尿中β2-受体激动剂类、硝基呋喃代谢物类、硝基咪唑类、氯丙嗪、氯霉素等5类12种禁用兽药残留量同时检测的方法。

试样中加入4.5 mL 0.2 mol/L乙酸铵溶液和40 μL β-葡萄糖醛酸酶/芳基硫酸酯酶,37 ℃酶解2 h后,再加入1.5 mL 1.0 mol/L盐酸溶液和100 μL 0.1 mol/L邻硝基苯甲醛溶液,经37 ℃衍生16 h,用8 mL乙酸乙酯萃取,下层水相用混合型阳离子交换固相萃取柱萃取,合并2次萃取液,氮气吹干复溶,正负离子多反应监测模式下检测,同位素内标法定量。

12种化合物在各自范围内线性关系良好,相关系数(r)>0.99;氯霉素的检出限为0.05 μg/L,定量限为0.1 μg/L,其他化合物的检出限为0.25 μg/L,定量限为0.5 μg/L;在定量限1倍、2倍、10倍添加水平下的平均回收率为83.6%~115.3%, RSD为2.20%~12.34%。方法灵敏度高,稳定性好,定量准确,适用于猪尿中12种禁用兽药残留量的同时测定。

PART.01{ 样品前处理 }
吸取试样2 mL置于50 mL聚丙烯离心管1内,加入50 μL内标混合溶液,再加入4.5 mL 0.2 mol/L乙酸铵溶液和40 μL β-葡萄糖醛酸酶/芳基硫酸酯酶,涡旋混匀,于37 ℃水浴振荡酶解2 h后,加入1.5 mL 1 mol/L盐酸溶液和0.1 mol/L邻硝基苯甲醛溶液100 μL,涡旋混匀,于37 ℃水浴振荡衍生16 h后,加入8 mL乙酸乙酯,涡旋10 s,以5000 r/min离心5 min,取上层乙酸乙酯至离心管2内,下层水相转入经5 mL甲醇和6 mL水活化、平衡后的混合型阳离子交换固相萃取（MCX）小柱内,分别用6 mL水和6 mL甲醇淋洗小柱,空气吹干小柱,用6 mL 5%氨化甲醇洗脱目标物,收集全部洗脱液至离心管2内,在45 ℃水浴下氮气吹至干,残渣用1 mL 5%乙腈水溶液超声复溶,过0.22 μm滤膜后上机测定。

PART.02{ 仪器条件 }
色谱柱:
Titank C18(100 mm×2.1 mm, 3.0 μm,广州菲罗门科学仪器有限公司)
;流动相A:
乙腈,流动相
B: 0.1%甲酸水溶液;梯度洗脱:0~2.5 min, 2%A~5%A; 2.5~3.0 min, 5%A~15%A; 3.0~5.0 min, 15%A~35%A; 5.0~7.0 min, 35%A~55%A; 7.0~9.0 min, 55%A~95%A; 9.0~11.0 min, 95%A; 11.0~11.01 min, 95%A~2%A; 11.01~14.0 min, 2%A。流速:0.3 mL/min;进样体积:5 μL;柱温:40 ℃。

离子源:ESI源,正、负离子扫描模式;多反应监测(MRM)模式;雾化气压力(GS1): 275.8 kPa;辅助加热气压力(GS2): 275.8 kPa;气帘气压力(CUR): 275.8 kPa;离子源温度:550 ℃;电喷雾电压(IS):5500 V和-4500 V。其他质谱参数见原文表1。

PART.03{ 结论}
采用酶解、酸解衍生、液液萃取结合固相萃取,建立了猪尿中β2-受体激动剂、硝基呋喃代谢物、硝基咪唑类、氯丙嗪、氯毒素等5类12种药物同时检测的方法。本文讨论了酶解、酸解衍生处理对目标物的影响,对比优化了前处理技术,可为多类别兽药残留检测技术研究提供参考。


文章信息
色谱, 2024, 42(5): 474-480
DOI: 10.3724/SP.J.1123.2023.09020
本文由原文作者撰稿，《色谱》编辑部编辑，欢迎分享~~
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