气相色谱定量分析中的“组校准/组校正”

王中泰

气相色谱定量分析中的“组校准/组校正”

      

在气相色谱定量分析中，“组校准/组校正”是常见的功能之一，主要用于合并计算相邻或者不相邻的多个色谱峰（化合物）的峰面积，并实现使用上述多个色谱峰（化合物）的总面积与总浓度绘制标准曲线，换言之，该标准曲线的浓度值（横坐标）和响应值（纵坐标）是多个色谱峰（化合物）的加和。

使用“组校准/组校正”功能的常见场景举例如下：

①同分异构体的合并定量：即标物为某物质多个同分异构体的混合物，样品信息为多个同分异构体的总浓度，经过色谱柱分离后同分异构体出多个峰，此时需要将多个同分异构体的响应值（峰面积）加和后作为纵坐标，与总浓度作为横坐标绘制标准曲线进行定量；

      

②单组分变多组分后的合并定量：即单一组分经过前处理后，衍生或者分解出多个组分，需要将产生的多个组分的响应值（峰面积）加和后作为纵坐标，与原组分浓度作为横坐标绘制标准曲线进行定量等。

        

本文介绍使用气相色谱工作站实现“组校准/组校正”具体步骤，使用的测试数据来源于安捷伦科技的7890A、7890B以及7820仪器，使用的工作站软件是OpenLab CDS ChemStation Edition for GCSystems（版本号：C.01.07），测试方法参考的标准为《GB 5009.97-2016 食品安全国家标准 食品中环己基氨基磺酸钠的测定》。

      

1 、标准内容简述

标准《GB 5009.97-2016 食品安全国家标准 食品中环己基氨基磺酸钠的测定》规定了食品中环己基氨基磺酸钠（甜蜜素）的三种测定方法：气相色谱法、液相色谱法和液相色谱-质谱/质谱法；其中气相色谱法的原理是：食品中的环己基氨基磺酸钠用水提取，在硫酸介质中环己基氨基磺酸钠与亚硝酸反应，生成环己醇亚硝酸酯（HJC-N-ester），利用气相色谱氢火焰离子化检测器进行分离及分析，保留时间定性，外标法定量。

      

由于在衍生化反应中，环己基氨基磺酸钠除了生成环己醇亚硝酸酯（HJC-N-ester）之外，环己醇亚硝酸酯有机会水解生成环己醇（HJC），因此在定量过程中，需要以环己醇亚硝酸酯（HJC-N-ester）和环己醇（HJC）两峰面积之和为纵坐标绘制标准曲线。使用“组校准/组校正”功能，可以实现上述要求。

2 在工作站中的实现“组校准/组校正”功能

在使用“组校准/组校正”功能之前，需要了解如何使用工作站进行标准曲线的绘制。

2.1 打开离线工作站，并在方法菜单中调用分析方法

打开离线工作站之后，在方法菜单中调用相应的分析方法（本例中分析方法为HP-5甜蜜素-2.M，仅供参考；如果是序列数据，则使用序列方法，如果是单次分析样品数据，则使用主方法）。随后进行的积分、绘制标准曲线等操作信息都将保存于调用的分析方法中。

2.2 调用相应的数据文件 在离线工作站的数据浏览窗口，双击需要进行校准（校正，绘制标准曲线）的数据，下图：

在数据文件导航表中能够看到不同样品的色谱分析数据文件列表，一般默认显示第一行数据文件的谱图。

        

2.3 为校正表添加“化合物组编号”选项

离线工作站中，在校正菜单中选择“校正表选项”→“编辑选项”，在弹出的对话框中，将“化合物组编号”，由不显示的列移动到显示的列中；可以看到，校正表中出现“组”字样，下图：

2.4 在软件中绘制校正曲线（标准曲线）

按照以下步骤绘制校正曲线（标准曲线），双击数据文件导航表第一行，默认打开的为最低浓度点的色谱图。

        

2.4.1 积分窗口-调整色谱图积分参数

开始校正之前，确认界面为积分窗口；在标准样色谱图上方点击积分按钮，进入积分窗口；在积分窗口，可以调整色谱峰的积分参数、删除不需要的色谱峰等，本文略去该步骤，不进行积分调整。

如果进行了积分调整，请在方法菜单中选择“保存方法”（或者“保存序列方法”）

        

2.4.2 进入校正窗口

进行校正时，确认界面为校正窗口；在标准样色谱图上方点击校正按钮，进入校正窗口；

2.4.3 新建校正表并添加第一个浓度点在校正菜单中选择新建校正表；在弹出的对话框中输入级别和缺省含量（默认打开的为最低浓度点的色谱图）；
点击确认后，色谱图中的所有峰将会被添加到校正表中，下图：

2.4.4 编辑校正表-删除不需要的色谱峰

将光标置于校正表中编号列的左侧，点击可以选中相应的行；如果不需要对该色谱峰进行校正和定量，点击校正表上部的删除按钮，将其删除，下图

2.4.5 在校正表中添加所有浓度点的级别

1）添加第二个浓度点

打开第二个浓度点的色谱图，在校正菜单中选择添加级别；在弹出的对话框中输入级别和缺省含量，校正表中将会增加该浓度点色谱图中目标化合物色谱峰的相关信息，下图：