储备液和工作液，标准品的各种形态注意分辨

王中泰

储备液和工作液，标准品的各种形态注意分辨

         

色谱分析实验中，标准品使用方式灵活多样：（少量纯品配制成）低浓度标液直接使用、（纯品配制成）高浓度标准溶液稀释使用。我们在实验室天天接触，熟悉却不一定了解它们。

         

一支标准品从原液或纯品形态“变身”为直接使用的形态，通常会经历标准品→储备液→工作液阶段，不同阶段的有效期也不同。接下来，小编带大家进一步认识标准品的这些“变换形态”。

标准储备液（或贮备液）

         

基本信息

▶ 部分标准文件称贮备液。

▶ 通常是用标准品配制成的或者直接购买的高浓度标准溶液，浓度远高于最高使用浓度，同一项目中一般不直接使用。

▶ 在食品、药品、化妆品等检测领域，贮备液通常配制成1mg/L（或1000μg/mL），但也有部分食品中毒素类检测项目如黄曲霉毒素，由于实际使用浓度很低，可能配制成10μg/mL甚至更低浓度。环境监测领域部分项目可能需要配制成更高浓度，如2mg/L~10mg/L（或称2000μg/mL~10000μg/mL）。

         

用途

▶ 稀释成不同浓度的工作溶液。

         

溶剂的选择

▶ 根据化合物性质选择不发生反应、溶解性较好、或适用于后续实验的种类。

▶ 可用流动相。

▶ 遵守SOP或参照现行标准、文献。

         

优点

▶ 分装后可多次使用，省去多次称量纯品/取用原液的麻烦；

▶ 避免每次配制的工作溶液间的浓度差异带来数据的偏差。

         

标准工作溶液基本信息

▶ 分为标准使用液和标准中间液，不同标准文件叫法不同。

▶ 工作溶液是储备液按一定比例稀释后的标准溶液，浓度视具体实验需要而定。

▶ 如果储备液浓度过高，使用前还需要梯度稀释至使用浓度，此时就会有中间梯度的标准中间溶液。

用途

▶ 外标法：配制成不同浓度梯度用于绘制标准曲线。

▶ 内标法：加入样品基质/提取液用于校正标准曲线、校正分析仪器状态等。

▶ 质量控制：加入空白基质/空白溶液检测加标回收率、检验基质效应。

         

溶剂选择

▶ 不与化合物发生反应、有一定溶解性、适用于后续实验的种类。

▶ 不一定要溶解性最好，溶剂与流动相极性不能相差太大，否则会出现溶剂效应，表现为峰型异常、上样后柱压升高甚至保留时间漂移等现象。

▶ 可用流动相稀释储备液获得。

▶ 遵守SOP或参照现行标准、文献。

储备液和工作液的有效期

相比纯品或标液原液，配制的储备液和工作液有效期会极大缩短。

         

▶ 未开封时纯品有效期通常2-5年，标液原液的有效期通常0.5-2年（注：不同品牌、不同化合物的标准品有差异，以证书为准），而配制成贮备液或工作溶液后，有效时限则缩短至数月到数周。

         

▶ 部分标准文件中对于标准贮备液和工作溶液的参考有效期，部分标准文件在标液配制方法下对有效期做出规定：

例1：GB/T 27404-2008 实验室质量控制规范 食品理化检测附录C中提供了常检的农兽药标准溶液的参考有效期：0.5mg/L~1mg/L贮备液保存在0℃左右冰箱中，有效期6个月，0.5μg/L~1μg/L工作溶液保存在0℃-5℃冰箱中，有效期2-3周。

例2：GB 5009.82-2016 食品安全国家标准 食品中维生素A、D、E的测定中，标准溶液配制部分（例如 10.4一节）对储备液和中间液的有效期做出了说明，工作溶液部分没有说明有效期，鉴于维生素E属于不稳定的化合物，此类工作溶液需要现用现配。

▶ 贮备液和工作溶液的有效期是大家都很关心的问题。尽管部分标准中提供了明确的时间范围，实际上每个实验室对标准溶液的保存条件和使用情况都存在不同程度的差异。因此实际有效期短于标准为宜，且最好分装成一次性使用的包装。