色谱保护柱的选择与使用你会吗？

王中泰

色谱保护柱的选择与使用你会吗？

对于色谱而言，色谱柱的性能是实验结果准确的关键。保护柱，相信大家都不陌生，其主要作用是减少色谱柱柱头污染。今天我们就浅谈一下气相色谱和液相色谱的保护柱的选择与作用。

首先是液相色谱柱，液相色谱柱保护柱通常分为两种，一种是包含柱体及筛板，起到的作用以过滤流动相和样品颗粒物为主。另外一种是包含柱体及填料的，类似一节短小的色谱柱，其主要作用除了过滤颗粒物外，还能通过填料吸附杂质。

对于筛板类保护柱，往往是用在小尺寸色谱柱（UPLC色谱柱）前，在过滤颗粒物的同时，有效规避填料尺寸对整个分析结果的影响。在使用过程中，如果发现系统压力升高，更换保护柱内筛板更加容易，且部分厂家筛板是可以超声重复使用的。

而对于带有填料的保护柱而言，往往是用在常规尺寸色谱柱（HPLC色谱柱）前，能有效减少柱头的污染，延长色谱柱寿命。需要注意的是保护柱填料的选择，尽量使保护柱填料的类型、粒径都与分析用色谱柱保持一致，例如：C18 5μm色谱柱，建议搭配的保护柱填料是同品牌同类型C18 5μm填料，以确保分离效果的一致性。

同时，不可忽视的是增加保护柱，相当于延长了色谱柱的柱长，对分离的影响，有些情况下不容忽视。这类带填料的保护柱，可以像色谱柱一样的冲洗方式，但是冲洗时，切记不要连接色谱柱及检测器。不管是筛板类型还是填料类型的保护柱，在连接色谱柱时，尽可能选择较短的管线，如果柱温箱实在放不下需要上下分层使用的除外。

其次是气相色谱柱，填充柱目前市面上较少有保护柱产品，我们今天均以毛细管柱为例介绍，毛细管柱的保护柱，在市售的产品里，有集成一体的，也有分体的，集成的毛细管柱就是出厂前就在有填料的色谱柱前面增加一段5m-10m的空柱管（不含填料），如果出现污染导致的分离效果下降，可以截去一段前面的空柱管，以缓解污染情况。另外一种是需要大家自己买一段空柱管，然后通过两通连接到色谱柱上。市面在售的两桶包含惰性玻璃材质的和金属的零死体积两通。如果只是简单增加一个保护柱，惰性玻璃管两通比较常用，但如果是色谱柱断裂或要把两个30m色谱柱衔接在一起使用，零死体积两通就显得尤为重要。

可能有人会问，保护柱能不能接带填料的色谱柱（如废弃色谱柱出口端比较干净），实际上气相色谱柱在运用的时候，很少有人这么做，可以假想一下，以30m填料色谱柱为例，如果柱前增加10m同款填料的色谱柱，相当于您的色谱柱从30m变为了40m，分离效果会发生明显变化，如果实在有必要这么做，也建议你在写方法学的时候，就注明是增加了10m带填料的保护柱，并注明填料名称，如：5%聚甲基硅氧烷，否则后面是难以重现结果的。

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