关于GB 4789.3-2010平板计数法的疑问，望各位大师不吝赐教，谢谢！

叶子若雪

关于GB  4789.3-2010平板计数法的疑问，望各位大师不吝赐教，谢谢！
1.     8.2条款：“待琼脂凝固后再加3ml-4mlVRBA覆盖到平板表层”。这“3ml-4mlVRBA”是必须要加的么？
2、   8.3平板菌落数的选择“选取15CFU--150CFU之间的平板，分别计数平板上出现的典型和可疑的菌群菌落”。
      （2） 两个梯度的平皿菌落都在15-150CFU的范围内，又该如何取？   
      （1）是分别记录每个平皿上的“典型和可疑的菌群菌落”还是分别记录每个平板上的“典型”，“可疑的菌群菌落”？
3、  8.4证实实验：“从VRBA平板上挑取10个不同类型的典型和可以菌落”。
        （1）是从每个VRBA平板挑取10个不同类型的典型和可以菌落？
        （2）还是从一个梯度两个平皿中总共挑取10个？
        （3）还是从两个梯度里挑取四个平皿总共挑取10个？
        （4）平皿上长的菌落不到10个，又该如何挑取？
4、   8.4证实实验：“分别接种到GBLB”。
         （5）一个平皿上长了10个菌落，该如何接种？是将这10个菌落分别接种到10支GBLB肉汤管内？还是每个菌落取一环接种到支GBLB肉汤管内，连续接种10次？
5、   大肠菌群平板计数报告：“经最后证实为大肠菌群阳性的试管比例乘以8.3中计数的平菌群数，在乘以稀释倍数。”该怎么理解？
6、   如果做两个梯度实验，第一梯度长了5个，证实有3支阳性，那么结果又是怎么计算？